规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
1mg |
|
||
5mg |
|
||
10mg |
|
||
25mg |
|
||
50mg |
|
||
100mg |
|
||
250mg |
|
||
Other Sizes |
|
靶点 |
Toll-like Receptor 7/8 (TLR7/8)
|
||
---|---|---|---|
体外研究 (In Vitro) |
Resiquimod (R-848) 会导致半抗原和过敏原特异性的循环 T 细胞(包括 TH2 效应细胞)产生 IFN-γ,甚至失去产生 IL-4 的能力 [2]。在 BrdU 掺入实验中,瑞西莫德 (R848) 增加了 BrdU 阳性细胞的数量,并以剂量依赖性方式促进 PBL 增殖。在用 R848 处理的细胞中,NF-κB 活性的报告者荧光素酶显着增加(3.5 倍)[3]。
|
||
体内研究 (In Vivo) |
在动物模型中,大鼠和小鼠可用作瑞西莫德免疫介导的心脏组织损伤和细胞因子产生的模型。在 SPF 鸡中,肌肉注射 Resiquimod (R-848),剂量为 50 μg/只,可显着增加 IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-1β、IL-4、iNOS 和 IFN-α 的产生。 MHC-II 基因 [1]。
|
||
酶活实验 |
BrdU掺入测定法[3]
对于BrdU掺入测定,R848(1 µg/ml),CQ(10 µM)、CQ加R848或PBS加入到如前所述的6孔组织培养板中的PBL中(2 × 106 细胞/孔)。细胞在22 °C持续48 h、 并且根据制造商的说明书用BrdU细胞增殖测定试剂盒检测细胞增殖。测定进行了三次。 萤光素酶报告基因测定法[3] 对于萤光素酶测定,用萤火虫NF-κB-特异性萤光素酶报告载体pNFκB-Met-Luc2(Clontech,Mountain View,CA,USA)转染FG-9307细胞,如前所述(Chi等人,2013)。pNFκB-MetLuc2被设计用于直接从细胞培养基中监测NF-κB信号转导途径的激活。该载体含有位于最小TA启动子(PTA)上游的NF-κB增强子元件。位于PTA下游的是一个分泌的萤光素酶基因。转录因子与NF-κB增强子元件的结合允许MetLuc表达并分泌到周围的培养基中。pNFκB-MetLuc2已被证明在鱼类系统中起作用(Lauksund等人,2009)。通过与pSEAP2对照载体共转染来监测转染效率,该载体组成性地表达人分泌的增强型碱性磷酸酶(SEAP)。然后用R848(1 µg/ml),CQ(10 µM)、CQ加R848或PBS,并在22 °C持续24 h.然后分别使用萤光素酶测定试剂盒和Great EscAPe™SEAP化学发光检测试剂盒分析转染物的培养基的萤光素酶活性和SEAP活性。测定进行了三次。 |
||
细胞实验 |
MTT法测定细胞增殖[3]
为了制备PBL,从比目鱼尾静脉采集血液,并用L-15培养基以1:5稀释。将稀释后的血液放在61%Percoll上,并在400下离心 × 30的g 分钟。回收PBL层并用PBS洗涤三次。将细胞分布在96孔组织培养板(5 × 105 细胞/孔)在含有10%胎牛血清(FBS)的L-15培养基中,100 U/ml青霉素和100 µg/ml链霉素。用不同浓度(0、0.175、0.25、0.5、1、2、4、8和16 µg/ml)的R848用于48 h.为了抑制溶酶体酸化,将细胞与10 µM CQ用于1 R848处理前h。治疗后,20 µl,共5个 将mg/ml MTT{3-(4,5)-二甲基噻嗪(-z-y1)-3,5-二-苯并四唑溴化}加入到板中。培养板在22 °C 4 h、 和200 向板中加入µl二甲基亚砜以溶解还原的甲zan。然后在490读取铭牌 nm的微板读数器。为了确定Myd88抑制对R848诱导的细胞增殖的影响,将Myd88抑制剂Pepinh MYD(RQIKIWFQNRRMKWKK-RDVLPGTCVNS-NH2)和对照肽Pepinh control(RQIKiwFQNRRMKW KK-SLHGRGDPMEAFII-NH2)以50 µM,并将板在22 °C持续6 h.孵育后,用R848处理细胞,并如上所述进行MTT测定。为了确定NF-κB失活对R848诱导的细胞增殖的影响,将BAY-11-7082,一种IκB-α磷酸化的不可逆抑制剂,以1 µM,并将板在22 °C 1 h.孵育后,用R848处理细胞,并如前所述进行MTT测定。所有实验都进行了三次。 凋亡检测[3] 将先前制备的PBL分布在12孔组织培养板中(1 × 106 细胞/孔)在含有10%FBS的L-15培养基中,100 U/ml青霉素和100 µg/ml链霉素。R848(1 µg/ml),CQ(10 µM)、CQ加R848或PBS加入细胞中,并在22 °C持续12 h或48 h.孵育后,用冷PBS洗涤细胞两次。根据制造商的说明,使用结合了FITC的膜联蛋白V-FITC和PI细胞凋亡检测试剂盒,用FITC结合的膜联素V和碘化丙啶(PI)处理洗涤的细胞。然后使用配备有FlowJo软件(Tree Star Inc,Ashland OR)的FACSort流式细胞仪对细胞进行流式细胞术以进行数据分析。为了确定Myd88抑制对细胞凋亡的影响,将Pepinh MYD和Pepinh对照以50 µM。22孵化后 °C持续6 h、 用R848处理细胞,并如前所述进行膜联蛋白V/PI测定。为了确定NF-κB失活对R848诱导的抗细胞凋亡的影响,将BAY-11-7082以1 µM。22℃孵育后 °C 1 h、 用R848处理细胞,并如前所述进行膜联蛋白V/PI测定。所有实验都进行了三次。 定量实时逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)[3] 用RNAprep组织试剂盒从PBL中提取总RNA。使用M-MLV逆转录酶将1微克总RNA用于cDNA合成。如前所述(Zheng和Sun,2011),在Eppendorf Mastercycler中使用SYBR ExScript qRT-PCR试剂盒进行qRT-PCR。在每次PCR结束时进行扩增产物的熔解曲线分析,以确认仅扩增并检测到一种PCR产物。以β-肌动蛋白为内参照,采用比较阈值循环法分析靶基因的表达水平(Zhang et al.,2013)。实验进行了三次。 |
||
动物实验 |
|
||
参考文献 |
|
||
其他信息 |
Resiquimod is an imidazoquinoline.
A substance being studied in the treatment of some types of skin cancer. When put on the skin, resiquimod causes some immune cells to make certain chemicals that may help them kill tumor cells. It is also being studied to find out if adding it to a tumor vaccine improves the antitumor immune response. It is a type of imidazoquinoline and a type of immunomodulator. Resiquimod is an imidazoquinolinamine and Toll-like receptor (TLR) agonist with potential immune response modifying activity. Resiquimod exerts its effect through the TLR signaling pathway by binding to and activating TLR7 and 8 mainly on dendritic cells, macrophages, and B-lymphocytes. This induces the nuclear translocation of the transcription activator NF-kB as well as activation of other transcription factors. This may lead to an increase in mRNA levels and subsequent production of cytokines, especially interferon-alpha (INF-a) and other cytokines, thereby enhancing T-helper 1 (Th1) immune responses. In addition, topical application of resiquimod appears to activate Langerhans' cells, leading to an enhanced activation of T-lymphocytes. Due to its immunostimulatory activity, this agent may potentially be useful as a vaccine adjuvant. Drug Indication Investigated for use/treatment in genital herpes. Mechanism of Action Resiquimod is a Toll-like receptor 7 (TLR7) and TLR8 agonist that is a potent inducer of alpha interferon (IFN-alpha) and other cytokines. |
分子式 |
C17H22N4O2
|
|
---|---|---|
分子量 |
314.38
|
|
精确质量 |
314.174
|
|
元素分析 |
C, 64.95; H, 7.05; N, 17.82; O, 10.18
|
|
CAS号 |
144875-48-9
|
|
相关CAS号 |
Resiquimod-d5;2252319-44-9;Resiquimod;144875-48-9
|
|
PubChem CID |
159603
|
|
外观&性状 |
White to light yellow solid
|
|
密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
沸点 |
553.6±50.0 °C at 760 mmHg
|
|
熔点 |
193 °C
|
|
闪点 |
288.6±30.1 °C
|
|
蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
|
|
折射率 |
1.635
|
|
LogP |
2.15
|
|
tPSA |
86.19
|
|
氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
氢键受体(HBA)数目 |
5
|
|
可旋转键数目(RBC) |
5
|
|
重原子数目 |
23
|
|
分子复杂度/Complexity |
406
|
|
定义原子立体中心数目 |
0
|
|
SMILES |
O([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])N1C(C([H])([H])OC([H])([H])C([H])([H])[H])=NC2C(N([H])[H])=NC3=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C3C1=2
|
|
InChi Key |
BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N
|
|
InChi Code |
InChI=1S/C17H22N4O2/c1-4-23-9-13-20-14-15(21(13)10-17(2,3)22)11-7-5-6-8-12(11)19-16(14)18/h5-8,22H,4,9-10H2,1-3H3,(H2,18,19)
|
|
化学名 |
1-(4-amino-2-(ethoxymethyl)-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-yl)-2-methylpropan-2-ol
|
|
别名 |
|
|
HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
溶解度 (体外实验) |
|
|||
---|---|---|---|---|
溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.95 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;再向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,您可以将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 3.1809 mL | 15.9043 mL | 31.8086 mL | |
5 mM | 0.6362 mL | 3.1809 mL | 6.3617 mL | |
10 mM | 0.3181 mL | 1.5904 mL | 3.1809 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。