| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HSP70 ( EC50 = 4.6 μM )
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：ML346 是一种新型 Hsp70 激活剂，在 HeLa 细胞中的 EC50 为 4600 nM。 10 μM 的 ML346 可恢复蛋白质稳态，恢复 CFTR 介导的碘化物电导，并增强在两个不同细胞区室中表达的蛋白质的正确折叠。 ML346（化合物 F1）可诱导多种反应，并强烈诱导 Hsp70、氧化应激反应基因（HO1 和 GCLM），以及 WT MEF 细胞中 BiP 上调 2.5 倍。 ML346 (0.5-25 μM) 在 35 分钟的严重热休克后对细胞表现出细胞保护作用，并且还对 H2O2 诱导的细胞凋亡产生双重保护。激酶测定：将 HeLa 细胞与作为阴性对照的 DMSO、或阳性对照 MG132 (10 μM) 和乳胞素 (6 μM) 或 PRs A1、A3 和 ML346 (F1) 一起孵育 3 和 6 小时，然后收获。将细胞在匀浆缓冲液（50 mM Tris-HCl、pH7.5、250 mM 蔗糖、5 mM MgCl2、2 mM ATP、1 mM DTT、0.5 mM EDTA、0.025% 毛地黄皂苷）中在冰上裂解 5 分钟，然后加入总蛋白测定全细胞提取物的浓度。将 3 μg 全细胞提取物与测定缓冲液（50 mM Tris-HCl、pH 7.5、40 mM KCl、5 mM MgCl2、0.5 mM ATP、1 mM DTT、0.05 mg/mL BSA）在黑色 96 孔板中混合通过添加 2× (200 μM) 荧光肽底物 Suc-LLVY-AMC 来启动反应。使用 Synergy H4 多模式酶标仪每 10 分钟测量一次荧光。细胞测定：将 HeLa 细胞接种于黑色 96 孔板（每孔 10,000 个细胞）中，加入 100 μL DMEM（补充有 10% FBS 和 1% Pen/Strep/Neo）。添加化合物之前，将板在 37°C、5% CO2 和 95% 相对湿度下孵育 16 小时。将 1 μL 的命中化合物 (ML346) 的 DMSO 溶液或单独的 DMSO 溶液分别添加到样品孔或对照孔中。然后将板放回培养箱中 24 小时。孵育后，用 200 μL PBS 洗涤细胞 2 次，并向每孔中添加 200 μL 1 μg/mL 钙黄绿素 AM 溶液。然后将细胞在 37°C、5% CO2 下孵育 45 分钟，然后使用 Analyst GT 多模式读数器进行荧光测量。细胞毒性百分比是相对于含有仅用 DMSO 处理的细胞的孔（100%）来表示的。
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| 酶活实验 |
该过程包括将 HeLa 细胞与 DMSO（阴性对照）、PR A1、A3 和 ML346 (F1) 或阳性对照 MG132 (10 μM) 和乳胞素 (6 μM) 一起孵育三或六个小时。将细胞在冰上溶解于均质缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH7.5，250 mM 蔗糖，5 mM MgCl2，2 mM ATP，1 mM DTT，0.5 mM EDTA）中裂解五分钟后，和0.025%洋地黄皂苷），计算全细胞提取物的总蛋白质含量。将测定缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.5，40 mM KCl，5 mM MgCl2，0.5 mM ATP，1 mM DTT，0.05 mg/mL BSA）与 3 μg 全脂混合将细胞提取物置于黑色 96 孔板中。通过添加 2× (200 μM) 荧光肽底物 Suc-LLVY-AMC 开始反应。每十分钟使用 Synergy H4 多模式酶标仪测量一次荧光[2]。
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| 细胞实验 |
将 HeLa 细胞以每孔 10,000 个细胞的密度置于黑色 96 孔板中，添加 100 μL DMEM（补充有 10% FBS 和 1% Pen/Strep/Neo）。添加化合物之前，将板在 37°C、5% CO2 和 95% 相对湿度下孵育 16 小时。向样品孔或对照孔中分别添加 1 μL DMSO 中的命中化合物 (ML346) 或单独的 DMSO。之后，将板在培养箱中保存一整天。孵育后，用200μL PBS洗涤细胞两次，并向每孔中加入200μL钙黄绿素AM（1μg/mL）溶液。在 37°C 和 5% CO2 下孵育 45 分钟后，使用 Analyst GT 多模式读数器对细胞发出荧光。所表达的细胞毒性百分比与含有单独用 DMSO 处理的细胞的孔相关 (100%)[2]。
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
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| 分子式 |
C14H12N2O4
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|---|---|---|
| 分子量 |
272.26
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| 精确质量 |
272.079
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| 元素分析 |
C, 61.76; H, 4.44; N, 10.29; O, 23.51
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| CAS号 |
100872-83-1
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
767276
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| 外观&性状 |
Orange to red solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.669
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| LogP |
0.88
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| tPSA |
84.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
452
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O(C([H])([H])[H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])/C(/[H])=C(\[H])/C(/[H])=C1\C(N([H])C(N([H])C\1=O)=O)=O
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| InChi Key |
IXYLVJHFJKDHRM-NSCUHMNNSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H12N2O4/c1-20-10-7-5-9(6-8-10)3-2-4-11-12(17)15-14(19)16-13(11)18/h2-8H,1H3,(H2,15,16,17,18,19)/b3-2+
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (4.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.6730 mL | 18.3648 mL | 36.7296 mL | |
| 5 mM | 0.7346 mL | 3.6730 mL | 7.3459 mL | |
| 10 mM | 0.3673 mL | 1.8365 mL | 3.6730 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Probe ML346 is not toxic to HeLa cells.Probe Reports from the NIH Molecular Libraries Program |
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 Probe ML346 (“F1”) induces Hsp70 mRNA expression.Probe Reports from the NIH Molecular Libraries Program |
 Probe ML346 (“F1”) induces chaperone protein expression.Probe Reports from the NIH Molecular Libraries Program |
 a,Wild type (hsf-1+/+) andb,HSF-1 null (hsf-1−/−) (MEFs) were treated for 4 h with probeML346(compound F1) at the indicated concentrations. |
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 Probe ML346 restores proteostasis. |
 Probe ML346 (compound F1) reduces aggregation/toxicity inC. elegansmodels of diseases associated with polyQ expansions.Probe Reports from the NIH Molecular Libraries Program |
BX-2819
Flavokawain 1i (DiNap)
HSP90-IN-9
HSP90-IN-10
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