| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Probe to detect intracellular ROS
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| 体外研究 (In Vitro) |
使用方案（这只是我们的建议；应该根据您的个人需求进行调整；它只是一个指南）。
1. 要制备 10 mM 提取溶液，请将 H2DCFDA 溶解在 DMSO 中。然后，在使用前再次提取。 2. 用含有 5 μM H2DCFDA 和 0.05% 胰蛋白酶-EDTA 溶液的 PBS 溶液在黑暗中将细胞在 37°C 下染色 30 分钟后，将细胞悬浮在新的培养基中并进行即时流式细胞术分析。 3. 如果需要，可将 H2DCFDA 探针与 ROS 不敏感的荧光素染料 DCFDA 修饰剂结合使用，作为改进的对照。染色过程与 H2DCFDA 相同[1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
结果：我们的研究表明：；（1） 在TBI后第3天和第7天，脾脏和BM中DC的频率和绝对数量改变；（2） 参与DC抗原呈递的关键分子的表面表达在TBI后第3天和第7天受到影响；（3） TBI后循环系统和淋巴系统的组织特异性DC亚群的分布和功能不平衡；（4） TBI后，DC的早期分化程序，特别是造血干细胞对常见DC祖细胞（CDPs）的承诺，被解除调节；和（5）TBI后第3天和第7天，DC祖细胞和分化的DC中的细胞内ROS水平降低。[2]
结论：我们的数据首次表明，TBI影响DC的分布模式，并导致淋巴和非淋巴器官中DC亚群的失衡。此外，目前的研究表明，TBI导致TBI后第3天和第7天DC中ROS水平降低，这可能解释了TBI后DC分化模式的改变。深入了解TBI后导致DC缺陷的分子机制对于治疗急性中枢神经系统（CNS）损伤（如TBI、中风和脊髓损伤）患者的感染至关重要。[2] |
| 酶活实验 |
染色示例1:
H2DCFDA（DCFH-DA）是一种具有绿色荧光的ROS产生探针 1.取出细胞培养基，用含有H2DCFDA的新鲜培养基代替，并与培养的细胞一起孵育30分钟。 2.用PBS洗涤细胞三次 3.使用共聚焦激光扫描显微镜检测细胞内ROS的产生。 染色示例2： 1.将测试细胞以105/孔的密度接种到6孔微孔板中，并在37°C、5%CO2中培养过夜。将含有50μg/mL不同材料的新鲜培养基加入每个孔中并培养16小时。 2.用PBS洗涤细胞，并用H2DCFDA染色细胞（20μM；1小时；37°C；深色） 3.将细胞胰蛋白酶消化、洗涤、重悬于PBS（0.2mL）中，通过流式细胞仪进行分析，并使用共聚焦激光扫描显微镜（FV1000，Olympus，Tokyo，Japan）进行成像。 染色示例3： 1.用PBS洗涤培养的细胞三次 2.在细胞培养箱中用H2DCFDA在培养基中处理测试细胞0.5小时 3.使用共焦激光扫描显微镜（Olympus，FV3000）进行图像处理。在BD LSRI Fortessa流式细胞仪分析仪上分析细胞以量化结果 |
| 细胞实验 |
指南（以下是我们推荐的方法，仅提供指南，应根据您的具体需求进行修改）
1.1 储备液的制备 用无水二甲基亚砜(DMSO)制备5mM H2DCFDA储备液 注：H2DCFDA储备溶液建议分装后在-20℃或-80℃的避光储存 1.2 工作液的制备 用预热的无血清细胞培养基或PBS稀释储备液，制备1-10μM H2DCFDA工作液 注：请根据您的具体需要调整H2DCFDA工作液的浓度，并根据需要进行配制 2. 细胞染色（悬浮细胞） 2.1 离心收集细胞，用PBS洗涤两次，每次5分钟。细胞密度为1×106/mL。 2.2 加入1mL染料工作溶液，在室温下孵育5-30分钟 2.3 400g，离心3-4分钟，弃去上清液 2.4 加入PBS洗涤细胞两次，每次5分钟 在1mL无血清培养基或PBS中重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞术进行观察 3. 细胞染色（贴壁细胞） 3.1 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞 3.2 从培养基上取下盖玻片，吸去多余的培养基 3.3 加入100μL染料工作液，轻轻摇动至完全覆盖细胞，孵育5-30分钟 3.4 取出染料工作液，用培养基洗涤2-3次，每次5分钟，用荧光显微镜或流式细胞仪观察 注：如果需要流式细胞仪检测，则需要在染色前对细胞进行消化并用胰蛋白酶重悬 |
| 动物实验 |
Long bones, spleen, peripheral lymph nodes (pLNs), mesenteric lymph nodes (mLNs), liver, lungs, skin and blood were collected from mice with either moderate-level cortical impact (CCI) or sham on day 1, day 3 or day 7 after TBI. Bone marrow cells were isolated from the tibias and femurs of hind limb through flushing. Tissues were digested with Collagenase-D and DNase I. Skin biopsies were digested in the presence of liberase + DNase I. Single cell suspensions were made, red blood cells were lysed with Ammonium chloride (Stem Cell Technology) and subsequently filtered using a 70 μM nylon mesh. DC subsets of the tissues and DC progenitors of the BM were identified through 10-color flow cytometry-based immunophenotyping studies. Intracellular reactive oxygen species (ROS) were identified through H2DCFDA staining.[2]
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| 参考文献 |
[1]. Lyublinskaya OG, et al. Redox environment in stem and differentiated cells: A quantitative approach. Redox Biol. 2017 Aug;12:758-769.
[2]. J Neuroinflammation. 2022 Oct 1;19(1):238. doi: 10.1186/s12974-022-02609-5. |
| 其他信息 |
See also: Diacetyldichlorofluorescein (annotation moved to).
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| 分子式 |
C24H16CL2O7
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|---|---|
| 分子量 |
487.2856
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| 精确质量 |
486.027
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| CAS号 |
4091-99-0
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| 相关CAS号 |
4091-99-0;
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| PubChem CID |
77718
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| 外观&性状 |
Typically exists as white to off-white solids at room temperature
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
593.5±50.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
209-210ºC(lit.)
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| 闪点 |
312.7±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.635
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| LogP |
4.62
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| tPSA |
99.13
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
717
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1=C(C([H])=C2C(=C1[H])C([H])(C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C(=O)O[H])C1=C([H])C(=C(C([H])=C1O2)OC(C([H])([H])[H])=O)Cl)OC(C([H])([H])[H])=O
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| InChi Key |
PXEZTIWVRVSYOK-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H16Cl2O7/c1-11(27)31-21-9-19-15(7-17(21)25)23(13-5-3-4-6-14(13)24(29)30)16-8-18(26)22(32-12(2)28)10-20(16)33-19/h3-10,23H,1-2H3,(H,29,30)
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| 化学名 |
2-(3,6-diacetyloxy-2,7-dichloro-9H-xanthen-9-yl)benzoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: This product requires protection from light (avoid light exposure) during transportation and storage. |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~256.52 mM)
Ethanol : ~20 mg/mL (~41.04 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.27 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0522 mL | 10.2608 mL | 20.5217 mL | |
| 5 mM | 0.4104 mL | 2.0522 mL | 4.1043 mL | |
| 10 mM | 0.2052 mL | 1.0261 mL | 2.0522 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
HX-1171(HTHQ)
新橙皮苷
辛伐他汀羟酸铵盐
Disodium (R)-2-Hydroxyglutarate
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COA
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