| 规格 | 价格 | |
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| 5mg | ||
| 10mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
ROCKII:12 nM (IC50); CaMKII:0.18 μM (IC50); PKG:0.36 μM (IC50); AuroraA:0.745 μM (IC50); MLCK:28.3 μM (IC50); EGFR:50 μM (IC50); MKK4:16.9 μM (IC50); GSK3α:60.7 μM (IC50); PKA:3.03 μM (IC50); Src:3.06 μM (IC50); PKC:5.68 μM (IC50); Abl:7.77 μM (IC50); AMPK:100 μM (IC50) P38α:100 μM (IC50)
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| 体外研究 (In Vitro) |
Rho 激酶抑制剂 H-1152 对 ROCK2 的 IC50 为 12 nM。对于 CaMKII、PKG、AuroraA、PKA、Src、PKC、MLCK、Abl、EGFR、MKK4、GSK3α、AMPK 和 P38α，H-1152 (H-1152P) 的 IC50 值分别为 0.180、0.360、0.745，H-1152 (H-1152P) 同样表现出抑制作用降低[1]。 H-1152 对 Rho 激酶的效力为 1.6 nM Ki，对 PKA、PKC 和 MLCK 的效力分别为 0.63、9.27 和 10.1 μM Ki，对 PKA、PKC 和 MLCK 具有中度抑制作用。 H-1152 (0.1-10 µM) 对 LPA 处理的细胞中的 MARCKS 磷酸化表现出强烈的抑制作用，IC50 值为 2.5 µM；然而，在 PDBu 处理的细胞中没有观察到明显的效果 [2]。 H-1152 (0.5-10 μM) 不会导致神经元活力下降。此外，H-1152（1、5或10 μM）不会改变各种神经元形态的比例。此外，在 BMP4 和 LIF 培养物中，H-1152 (10 μM) 可以延长神经突 [3]。
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| 酶活实验 |
抑制蛋白激酶活性测定[2]
为了确定抑制剂在体外对rho激酶活性的影响，将抑制剂按指定浓度添加到50 μ L的测定混合物中，该混合物为50 mm Tris-HCl (pH 7.5)， 5 mm MgCl2, 1 mm EDTA, 1 mm EGTA, 1 mm二硫苏糖醇，40 μ m s6 -肽，不同浓度的[γ-32P]ATP和纯化的rho激酶，纯化方法如前所述(Nagumo et al. 2000)。反应以加入[γ-32P]ATP开始，在30℃下进行5 min。采用Michaelis - menten方程计算rho激酶的Michaelis常数(Km)和最大速度(Vmax)。进一步用二级图分析数据，计算抑制常数(Ki)。rho激酶抑制剂对蛋白激酶A (PKA)和C (PKC)的影响根据我们的方法进行了少量修改(Tokumitsu et al. 1991)。PKA反应在20µL混合物中进行，温度37℃，反应时间5 min，混合物中含有25 mm Tris-HCl (pH 7.0)， 10 mm MgCl2, 2 mm EGTA, 50µm环AMP反应元件结合蛋白肽和10µm[γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)。PKC反应在30µL的混合物中进行5min，混合物中含有50 mm Tris-HCl (pH 7.0)， 10 mm MgCl2, 0.5 mm CaCl2, 0.2 mg/mL III-S型组蛋白，50µg/mL磷脂酰丝氨酸和10µm[γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)。rho激酶抑制剂对肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的影响在之前其他地方描述的条件下(Asano et al. 1989)，在30µL的反应混合物中，包含40 mm HEPES (pH 7.0)， 5 mm醋酸镁，0.5 mm CaCl2, 0.1% (v/v) Tween-80, 5.3 nm钙调素，51µm肌球蛋白轻链肽，1.95 nm MLCK和[γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)[2]。
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| 细胞实验 |
将ROCK抑制剂 h -1152 用水稀释后，在培养液中再添加10 μl。控制组中加入了水。添加抑制剂18小时后，将培养物固定在4%多聚甲醛中(室温下1小时进行过氧化物酶联标记，室温下20分钟进行荧光标记)。ArrayScan/Cellomics自动分析:将细胞以50 μl的总体积置于384孔塑料板上，之前涂有聚d-赖氨酸/层粘连蛋白，并在相同的培养基中培养[3]。 为了研究蛋白激酶抑制剂(如H-1152 )的作用，将细胞与抑制剂一起预孵育15分钟，然后用LPA刺激1分钟或PDBu刺激5分钟。在刺激后的各个测定点，在培养物中加入5% (v/v)的三氯乙酸，并用橡皮刮板刮掉细胞。沉淀后，用含有6 mm二硫苏糖醇的丙酮洗涤，去除三氯乙酸，然后干燥。将干燥后的细胞粉末置于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS - page)样品缓冲液中，缓冲液中含有125 mm Tris (pH 7.4)、8 m尿素、10% (w/v)蔗糖、0.02% (w/v)溴酚蓝、4% (w/v) SDS和2-巯基乙醇，95℃加热5 min。样品通过0.22µm离心过滤器(Millipore, Bedford, MA, USA)去除不溶性物质。样品(2.5 × 105个细胞)进行SDS-PAGE (7.5%)/western blotting分析。凝胶中的蛋白质被电转移到聚偏二氟乙烯膜上。用5% (w/v)脱脂乳孵育后，用pS159-Mar-Ab对膜进行印迹，然后用抗小鼠IgG抗体对膜进行印迹。采用增强化学发光-western blotting检测试剂检测免疫反应性，采用KODAK 1D图像分析软件对x射线胶片进行扫描密度测定测定免疫反应性程度，并在每种条件下以与对照的百分比表示[2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
(S)-2-methyl-1-(4-methylisoquinoline-5-sulfonyl)-1,4-diazepane is a member of the class of isoquinolines that is the sulfonamide formed by the formal condensation of the sulfo group of 4-methylisoquinoline-5-sulfonic acid with the 1-amino group of (S)-2-methyl-1,4-diazepane. It has a role as an EC 2.7.11.1 (non-specific serine/threonine protein kinase) inhibitor. It is a member of isoquinolines and a N-sulfonyldiazepane. It is a conjugate base of a (S)-2-methyl-1-(4-methylisoquinoline-5-sulfonyl)-1,4-diazepane(2+).
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| 分子式 |
C16H21N3O2S
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|---|---|
| 分子量 |
319.423
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| 精确质量 |
319.1354
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| 元素分析 |
C, 60.16; H, 6.63; N, 13.16; O, 10.02; S, 10.04
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| CAS号 |
451462-58-1
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| 相关CAS号 |
H-1152 dihydrochloride;871543-07-6;Glycyl H-1152 hydrochloride;913844-45-8
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| PubChem CID |
448043
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| 外观&性状 |
Typically exists as Off-white to light yellow solids at room temperature
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| LogP |
4.867
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| tPSA |
70.68
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
22
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| 分子复杂度/Complexity |
476
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC1=CN=CC2=C1C(S(=O)(N3[C@@H](C)CNCCC3)=O)=CC=C2
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| InChi Key |
AWDORCFLUJZUQS-ZDUSSCGKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H21N3O2S/c1-12-9-18-11-14-5-3-6-15(16(12)14)22(20,21)19-8-4-7-17-10-13(19)2/h3,5-6,9,11,13,17H,4,7-8,10H2,1-2H3/t13-/m0/s1
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| 化学名 |
4-Methyl-5-[[(2S)-2-methyl-1,4-diazepan-1-yl]sulfonyl]isoquinoline
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| 别名 |
H 1152; H1152; 451462-58-1; (S)-2-METHYL-1-[(4-METHYL-5-ISOQUINOLINE)SULFONYL]-HOMOPIPERAZINE; H-1152P; CHEBI:88220; 4-methyl-5-[[(2S)-2-methyl-1,4-diazepan-1-yl]sulfonyl]isoquinoline; H1152; (S)-4-Methyl-5-((2-methyl-1,4-diazepan-1-yl)sulfonyl)isoquinoline;
H-1152
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1307 mL | 15.6534 mL | 31.3067 mL | |
| 5 mM | 0.6261 mL | 3.1307 mL | 6.2613 mL | |
| 10 mM | 0.3131 mL | 1.5653 mL | 3.1307 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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