| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ROCKII:12 nM (IC50); CaMKII:0.18 μM (IC50); PKG:0.36 μM (IC50); AuroraA:0.745 μM (IC50); MLCK:28.3 μM (IC50); EGFR:50 μM (IC50); MKK4:16.9 μM (IC50); GSK3α:60.7 μM (IC50); PKA:3.03 μM (IC50); Src:3.06 μM (IC50); PKC:5.68 μM (IC50); Abl:7.77 μM (IC50); AMPK:100 μM (IC50) P38α:100 μM (IC50)
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| 体外研究 (In Vitro) |
Rho 还原剂 H-1152 二盐酸盐对 ROCK2 的 IC50 为 12 nM。 H-1152 二盐酸盐 (H-1152 二盐酸盐 P) 也证明了对 CaMKII、PKG、AuroraA、PKA、Src、PKC、MLCK、Abl、EGFR、MKK4、GSK3α、AMPK 和 P38α 的较低抑制活性； IC50 值为 0.180、0.360、0.745、3.03、3.06、5.68、28.3、7.77、50.0、16.9、60.7、100 和 100 μM [1]。 1152 diHCl 的 Ki 为 1.6 nM，可有效抑制 Rho，但其 Ki 为 0.63、9.27 和 10.1 μM 时，对 PKA、PKC 和 MLCK 的抑制非常轻微。 H-1152 diHClide (0.1-10 μM) 对 LPA 处理的细胞中的 MARCKS 磷酸化表现出强烈的抑制作用，IC50 值为 2.5 μM；然而，在 PDBu 处理的细胞中没有观察到明显的效果 [2]。对 H-1152 二盐酸盐 (0.5–10 μM) 的反应，神经元持久率不会恢复。此外，H-1152 diHClide（1、5或10 μM）不会改变各种神经元形态的百分比。此外，在 BMP4 和 LIF 培养物中，10 μM H-1152 二盐酸盐可延长神经突 [3]。
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| 酶活实验 |
抑制蛋白激酶活性测定[2]
为了确定抑制剂在体外对rho激酶活性的影响，将抑制剂按指定浓度添加到50 μ L的测定混合物中，该混合物为50 mm Tris-HCl (pH 7.5)， 5 mm MgCl2, 1 mm EDTA, 1 mm EGTA, 1 mm二硫苏糖醇，40 μ m s6 -肽，不同浓度的[γ-32P]ATP和纯化的rho激酶，纯化方法如前所述(Nagumo et al. 2000)。反应以加入[γ-32P]ATP开始，在30℃下进行5 min。采用Michaelis - menten方程计算rho激酶的Michaelis常数(Km)和最大速度(Vmax)。进一步用二级图分析数据，计算抑制常数(Ki)。rho激酶抑制剂对蛋白激酶A (PKA)和C (PKC)的影响根据我们的方法进行了少量修改(Tokumitsu et al. 1991)。PKA反应在20µL混合物中进行，温度37℃，反应时间5 min，混合物中含有25 mm Tris-HCl (pH 7.0)， 10 mm MgCl2, 2 mm EGTA, 50µm环AMP反应元件结合蛋白肽和10µm[γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)。PKC反应在30µL的混合物中进行5min，混合物中含有50 mm Tris-HCl (pH 7.0)， 10 mm MgCl2, 0.5 mm CaCl2, 0.2 mg/mL III-S型组蛋白，50µg/mL磷脂酰丝氨酸和10µm[γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)。rho激酶抑制剂对肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的影响在之前其他地方描述的条件下(Asano et al. 1989)，在30µL的反应混合物中，包含40 mm HEPES (pH 7.0)， 5 mm醋酸镁，0.5 mm CaCl2, 0.1% (v/v) Tween-80, 5.3 nm钙调素，51µm肌球蛋白轻链肽，1.95 nm MLCK和[γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)[2]。 |
| 细胞实验 |
将ROCK抑制剂 h -1152 用水稀释后，在培养液中再添加10 μl。控制组中加入了水。添加抑制剂18小时后，将培养物固定在4%多聚甲醛中(室温下1小时进行过氧化物酶联标记，室温下20分钟进行荧光标记)。ArrayScan/Cellomics自动分析:将细胞以50 μl的总体积置于384孔塑料板上，之前涂有聚d-赖氨酸/层粘连蛋白，并在相同的培养基中培养[3]。
为了研究蛋白激酶抑制剂(如H-1152 )的作用，将细胞与抑制剂一起预孵育15分钟，然后用LPA刺激1分钟或PDBu刺激5分钟。在刺激后的各个测定点，在培养物中加入5% (v/v)的三氯乙酸，并用橡皮刮板刮掉细胞。沉淀后，用含有6 mm二硫苏糖醇的丙酮洗涤，去除三氯乙酸，然后干燥。将干燥后的细胞粉末置于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS - page)样品缓冲液中，缓冲液中含有125 mm Tris (pH 7.4)、8 m尿素、10% (w/v)蔗糖、0.02% (w/v)溴酚蓝、4% (w/v) SDS和2-巯基乙醇，95℃加热5 min。样品通过0.22µm离心过滤器(Millipore, Bedford, MA, USA)去除不溶性物质。样品(2.5 × 105个细胞)进行SDS-PAGE (7.5%)/western blotting分析。凝胶中的蛋白质被电转移到聚偏二氟乙烯膜上。用5% (w/v)脱脂乳孵育后，用pS159-Mar-Ab对膜进行印迹，然后用抗小鼠IgG抗体对膜进行印迹。采用增强化学发光-western blotting检测试剂检测免疫反应性，采用KODAK 1D图像分析软件对x射线胶片进行扫描密度测定测定免疫反应性程度，并在每种条件下以与对照的百分比表示[2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
(S)-2-methyl-1-(4-methylisoquinoline-5-sulfonyl)-1,4-diazepane dihydrochloride is a hydrochloride salt resulting from the reaction of (S)-2-methyl-1-(4-methylisoquinoline-5-sulfonyl)-1,4-diazepane with 2 mol eq. of hydrogen chloride. An ATP-competitive inhibitor of Rho kinase (ROCK). It has a role as an EC 2.7.11.1 (non-specific serine/threonine protein kinase) inhibitor. It contains a (S)-2-methyl-1-(4-methylisoquinoline-5-sulfonyl)-1,4-diazepane(2+).
A group of intracellular-signaling serine threonine kinases that bind to RHO GTP-BINDING PROTEINS. They were originally found to mediate the effects of rhoA GTP-BINDING PROTEIN on the formation of STRESS FIBERS and FOCAL ADHESIONS. Rho-associated kinases have specificity for a variety of substrates including MYOSIN-LIGHT-CHAIN PHOSPHATASE and LIM KINASES. |
| 分子式 |
C16H23CL2N3O2S
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|---|---|
| 分子量 |
392.3437
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| 精确质量 |
391.088
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| 元素分析 |
C, 48.98; H, 5.91; Cl, 18.07; N, 10.71; O, 8.16; S, 8.17
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| CAS号 |
871543-07-6
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| 相关CAS号 |
H-1152;451462-58-1;Glycyl H-1152 hydrochloride;913844-45-8
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| PubChem CID |
11560225
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| 外观&性状 |
Typically exists as White to yellow solids at room temperature
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| LogP |
4.867
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| tPSA |
70.68
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
476
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
S(N1CCCNC[C@@H]1C)(C1C=CC=C2C=NC=C(C=12)C)(=O)=O.Cl
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| InChi Key |
BFOPDSJOLUQULZ-GXKRWWSZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H21N3O2S.2ClH/c1-12-9-18-11-14-5-3-6-15(16(12)14)22(20,21)19-8-4-7-17-10-13(19)2;;/h3,5-6,9,11,13,17H,4,7-8,10H2,1-2H3;2*1H/t13-;;/m0../s1
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| 化学名 |
4-methyl-5-[[(2S)-2-methyl-1,4-diazepan-1-yl]sulfonyl]isoquinoline;dihydrochloride
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| 别名 |
H-1152 Dihydrochloride; 871543-07-6; H-1152 (dihydrochloride); H1152; 4-methyl-5-[[(2S)-2-methyl-1,4-diazepan-1-yl]sulfonyl]isoquinoline;dihydrochloride; brd7446 dihydrochloride; Rho Kinase; H 1152 dichloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~35.71 mg/mL (~91.02 mM)
DMSO : ~10 mg/mL (~25.49 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 50 mg/mL (127.44 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5488 mL | 12.7440 mL | 25.4881 mL | |
| 5 mM | 0.5098 mL | 2.5488 mL | 5.0976 mL | |
| 10 mM | 0.2549 mL | 1.2744 mL | 2.5488 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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