p38α 50 nM (IC50) p38β2 100 nM (IC50)

SB 202190（0-10 μM；0-72 小时）盐酸盐以剂量和时间依赖性方式抑制某些 CRC 细胞系的增殖，包括 RKO、CACO2 和 SW480。在这一类似的 CRC 系子集（RKO、CACO2 和 SW480）中，SB 202190 盐酸盐显着减少集落形成和贴壁独立生长（10 μM，持续 7-10 天）并增加凋亡细胞死亡（10 μM，持续 72 小时）[ 2]。 p38i 通过水解 SB 202190（10 μM；2 小时）磷酸化 S6K1 (T389) 和 S6(S235/236) 但不磷酸化 AKT (S473)，从而选择性抑制 RKO、CACO2 和 SW480 细胞中的 mTORC1 信号传导[2]。

SB 202190（5 mg/kg；每天一次，持续10-12天；腹腔注射）盐酸盐具有抑制恶性细胞增殖和存活的作用。
在被动转移小鼠模型中，施用抑制 p38 的 SB202190 可防止 PV IgG 诱导的水泡形成。 [5]在脓毒症内毒素模型中，使用 SB202190 进行治疗比对照具有统计学上显着的生存优势。 [8]
SB202190和SN-50在脂多糖模型中显著提高了存活率（P=0.0006），但在细菌或CLP模型中没有（分别为P=0.9和0.3）。SB202190和SN-50与抗生素联合使用，在CLP模型中产生了显著的生存益处（分别为P=0.0001和0.006）。在CLP后2小时，肿瘤坏死因子α和白细胞介素-6的循环水平显著降低（分别为P=0.047和0.036），Western blot显示，用p38MAPK和SN-50抑制剂联合抗生素治疗的动物在CLP 2小时后p38激酶下调。 结论：我们已经证明，抑制p-38和NF-κB可以提高内毒素休克患者的存活率，而多菌败血症的存活率需要共存的抗生素治疗。

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血管性痴呆（VaD）是一种常见的与年龄相关的神经退行性疾病，由慢性缺氧引起。在本研究中，我们研究了p38 MAPK抑制剂SB202190对永久性双侧颈动脉闭塞（2-VO）建立的VaD慢性低灌注大鼠模型中海马细胞凋亡和空间学习记忆缺陷的保护作用。60只大鼠随机分为假手术组、VaD模型组和VaD+SB202190组（n=20/组）。假手术/2-VO后，大鼠通过侧脑室注射给予0.1%DMSO（假手术组和VaD组）或SB202190。抑制剂/载体治疗一周后，模型组海马p38 MAPK磷酸化水平高于SB202190组（P<0.01）。与模型组相比，SB202190组在Morris水迷宫隐藏平台试验中的逃逸潜伏期显著缩短（P<0.01），在探测试验中在原始平台象限的逃逸时间更长（P<0.01）。与VaD模型大鼠相比，SB202190组还显示海马神经元凋亡显著减少（P<0.01），Bcl-2表达升高（抗凋亡），caspase-3表达降低（促凋亡）（两者均P<0.01）。总之，在永久性2-OV后，SB202190阻断p38 MAPK信号通路可减少海马神经元的凋亡，并挽救空间学习和记忆缺陷[12]。

p38α 和 p38β 在 25 mM Tris-HCl（pH 7.5）中测量，以 0.1 mM EGTA 和 0.33 mg/mL 髓磷脂碱性蛋白作为底物。使用 [γ-33P]ATP 时，可以在 50 L 培养箱中在 30 °C 下手动运行检测 10 分钟，或者使用 Biomek 2000 实验室自动化工作站在 96 孔板中在 25 L 培养箱中在室温下自动运行 40 分钟。乙酸镁和 ATP 的浓度分别为 10 和 0.1 mM。 MgATP 用于启动每次测定。为了结束手动测定，将孵育的等分试样点在磷酸纤维素纸上，然后浸没在 50 mM 磷酸中。通过添加 5 μL 0.5 M 磷酸，然后将等分试样点样到 P30 过滤垫上，结束机器人测定。然后将所有纸张在 50 mM 磷酸中清洗四次以去除 ATP，在丙酮（用于手动孵化）或甲醇（用于机器人孵化）中清洗一次，干燥，并计算放射性。

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蛋白激酶测定[2]
MAPKAPK 2测定如前所述进行。简而言之，Jurkat细胞被血清饥饿24小时，然后在用抗Fas单克隆抗体（100 ng/ml）处理2小时或如图图例所示单独处理之前，与或不与特异性p38抑制剂SB202190一起孵育30分钟。在裂解缓冲液中收获细胞，并通过离心澄清。在4°C下用抗MAPKAPK 2多克隆抗体免疫沉淀内源性MAPKAPK 2中3小时。以GST-hsp27为底物，在1μm ATP/10μCi[γ-32P]ATP（10 Ci/mmol）存在下，在30μl激酶缓冲液中于30°C下测定免疫复合物的活性30分钟。用Laemmli样品缓冲液终止反应。蛋白质经13%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影分离。磷酸化的蛋白质由PhosphorImager定量。

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半胱天冬酶活性测定[2]
在胱天蛋白酶抑制剂苄氧羰基Val-Ala-Asp（zVAD）-氟甲基酮存在或不存在的情况下，用或不用SB202190（50μm）、PD098059（50μm）处理Jurkat/neo或Jurkat/bcl-2细胞（106个细胞）24小时。然后在裂解缓冲液（25 mm Hepes，pH 7.4，0.25%Nonidet P-40，10μg/ml亮肽，10μg/ml抑肽酶，5 mm EDTA，2 mm苏二硫糖醇和10 mm地高辛）中收获细胞。裂解物通过离心澄清，上清液用于胱天蛋白酶测定。在含有20μg细胞提取物、20μm荧光肽乙酰基Asp-Glu-Val-Asp-氨基甲基香豆素（DEVD-AMC）的反应混合物中测量胱天蛋白酶活性，如所述。使用Cytofluor II荧光板读数器在360nm激发、460nm发射下测量荧光AMC产物形成。

用不同浓度的 SB 202190 处理血清饥饿细胞 24 小时。使用台盼蓝排除或碘化丙啶排除后进行流式细胞术分析以确定细胞的活力。 H33258染色用于观察凋亡细胞核。

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在人角质形成细胞系HaCaT中研究了p38 MAP激酶和ERK在UVB诱导的cox-2基因表达中的作用。UVB显著增加了cox-2基因在蛋白质和mRNA水平上的表达。正如我们之前报道的那样，在HaCaT细胞中，UVB照射后p38和ERK被显著激活。此外，用p38抑制剂SB202190或MEK抑制剂PD98059处理细胞分别特异性抑制UVB诱导的p38或ERK激活。在这项研究中，我们进一步研究了p38和ERK在UVB诱导的HaCaT细胞中cox-2基因表达中的作用。我们发现SB202190在不同时间点和不同UVB剂量下强烈抑制UVB诱导的COX-2蛋白表达。此外，SB202190显著抑制了UVB诱导的cox-2 mRNA。我们的数据表明，ERK在UVB诱导人角质形成细胞中的cox-2基因表达中不起作用，因为ERK的抑制不会显著改变UVB诱导cox-2蛋白和mRNA的增加。这些结果首次表明，UVB诱导人类角质形成细胞cox-2基因的表达需要p38的激活。由于cox-2的表达在紫外线致癌中起着重要作用，p38可能是癌症化学预防的潜在分子靶点。[2]

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在肾损伤期间，近端肾小管细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）的激活在最终导致肾纤维化的炎症事件中起着重要作用。我们假设，在这些细胞内局部抑制p38可能是治疗肾纤维化的一种有趣方法。为了实现这一点，我们开发了p38抑制剂SB202190[4-（4-氟苯基）-2-（4-羟基苯基）-5-（4-吡啶基）1H-咪唑]和载体溶菌酶的肾特异性结合物。首先，我们证明SB202190抑制了肾小管细胞（正常大鼠肾脏-52E）中白蛋白诱导的促炎（单核细胞趋化蛋白-1）和转化生长因子（TGF）-β1诱导的促纤维化（前胶原-α1）基因超过50%的表达。接下来，我们通过氨基甲酸酯键将SB202190与溶菌酶结合。然而，这种结合物在血清中孵育后迅速释放药物。因此，我们应用了一种新的基于铂（II）的连接体方法，即所谓的通用连接系统（ULS），它与SB202190形成配位键。SB202190 ULS溶菌酶在血清中保持稳定，但在肾匀浆中释放药物。SB202190 ULS溶菌酶在肾小管细胞中有效积累，并在单次静脉注射后3天内提供局部药物库。SB202190 ULS溶菌酶处理抑制了HK-2细胞中TGF-β1诱导的前胶原α1基因表达64%。最后，我们评估了单剂量偶联物在单侧肾缺血再灌注大鼠模型中的疗效。缺血再灌注损伤4天后，观察到肾内p38磷酸化和α平滑肌肌动蛋白蛋白表达减少。总之，我们开发了一种局部递送p38 MAPK抑制剂SB202190的新策略，该策略可用于治疗肾纤维化[3]。

C57BL/6J mice injected i.d. with a sterile solution of either control IgG or PV IgG
12.5 μg
Administered via i.d.

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The 60 Wistar rats were randomly assigned to the sham-operated group, the VaD model group, and the SB202190 group (20 animals each) using a random number table. The VaD rat model (n = 40) was established by separating and ligating the bilateral carotid artery via two-vessel occlusion (2-VO). For animals of the sham-operated group (n = 20), the bilateral carotid artery was separated using the same methods but without ligation. After recovery, animals of the SB202190 group received intracerebroventricular (ICV) injection of SB202190 (dissolved in 100% DMSO and then diluted in normal saline (NS) for a final concentration of DMSO of 0.1%) and both the VaD model and sham-operated groups received ICV injection of equal volume 0.1% DMSO. In each group, eight rats were examined in the Morris water maze to assess spatial learning and memory, six rats were sacrificed and brain sections were prepared for TUNEL staining and Bcl-2/caspase-3 immunohistochemistry, and six rats were sacrificed and tissue homogenates were prepared for Western blot assay of phospho-p38 MAPK expression.[12]

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All animals were administered 0.1% DMSO or SB202190 immediately after sham or 2-VO surgery by ICV injection. Briefly, after anesthesia by IP injection of a 10% chloral hydrate (0.35 mL/100 g body weight), the animal was secured within a Jiangwan I-C rat stereotaxic frame. The site for ICV injection was 0.8 mm caudal to bregma and 1.5 mm to the right of the midline. A hole was drilled horizontally with an electric drill and 5 μL of 0.1% DMSO or 10 μmol/L SB202190 solution was injected using a microinjector. The injection was completed in 4 min and the needle kept in position for an additional 2 min. One week after ICV injection, animals were examined in the Morris water maze or sacrificed and brain tissues were prepared for TUNEL staining, immunofluorescence, and Western blot.[2]

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Intraperitoneal lipopolysaccharide (30 mg/kg), tail vein injection of bacteria (Staphylococcus aureus + Salmonella Typhimurium, 5 x 10(7) colony forming units/kg) and cecal ligation and puncture (CLP) with or without antibiotics (Augmentin, 100 mg/kg) were the septic models used. Animals received control, SB-202190 (a p38 inhibitor), or SN-50 (an NF-kappaB inhibitor), and mortality was assessed by log-rank analysis. Blood was collected at different time points for cytokine analysis, and splenic tissue was used for cytoplasmic protein extraction to assess kinase activation.[8]

[1]. Biochem J. 2000 Oct 1;351(Pt 1):95-105.

[2]. J Biol Chem. 1998 Jun 26;273(26):16415-20.

[3]. Oncogene. 2001 Jun 28;20(29):3921-6.

[4]. J Pharmacol Exp Ther. 2006 Oct;319(1):8-19.

[5]. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006 Aug 22;103(34):12855-60.

[6]. Cell Signal. 2008 Apr;20(4):675-83.

[7]. Leuk Res. 2009 May;33(5):693-9.

[8]. J Surg Res. 2009 Mar;152(1):46-53.

[9]. Cancer Res. 2011 Feb 1;71(3):1041-9.

[10]. Mol Cancer Ther. 2012 Mar;11(3):561-71.

[11]. EMBO Rep. 2017 Nov;18(11):2067-2078.

[12]. Biomed Res Int. 2013:2013:215798.

SB-202190 is a member of the class of imidazoles that is 1H-imidazole in which the hydrogens at positions 2, 4, and 5 are replaced by 4-hydroxyphenyl, pyridin-4-yl, and 4-fluorophenyl groups, respectively. It is a widely used inhibitor of mitogen-activated protein kinase (MAPK) alpha and beta. It has a role as an EC 2.7.11.24 (mitogen-activated protein kinase) inhibitor and an apoptosis inducer. It is a member of imidazoles, a member of phenols, a member of pyridines and an organofluorine compound.
4-(4-Fluorophenyl)-2-(4-hydroxyphenyl)-5-(4-pyridyl)-1H-imidazole has been reported in Mammea siamensis with data available.

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p38, a subfamily of the mitogen-activated protein kinase, regulates gene expression in response to various extracellular stimuli. The pyridinyl imidazoles like SB202190 are specific inhibitors of p38alpha and p38beta and have been widely used in investigation of the biological functions of p38. Here we show that SB202190 by itself was sufficient to induce cell death, with typical apoptotic features such as nucleus condensation and intranucleosomal DNA fragmentation. SB202190 stimulated the activity of CPP32-like caspases, and its apoptotic effect was completely blocked by the protease inhibitor benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethyl ketone and expression of bcl-2. In addition, SB202190 was able to potentiate apoptosis induced by Fas(APO-1) ligation or UV irradiation. Expression of p38beta attenuated the apoptotic effect of SB202190 and the cell death induced by Fas ligation and UV irradiation. In contrast, expression of p38alpha induced cell death mildly. These results indicate that SB202190 induces apoptosis through activation of CPP32-like caspases and suggest that distinct members of the p38 subfamily of mitogen-activated protein kinase have different functions in apoptosis.[1]

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C20H15CLFN3O

367.80

367.088

C, 65.31; H, 4.11; Cl, 9.64; F, 5.17; N, 11.42; O, 4.35

350228-36-3

SB 202190;152121-30-7

135451580

Light yellow to yellow solid powder

5.452

61.8

3

4

3

26

415

0

XOQSUTIMRLPFPB-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C20H14FN3O.ClH/c21-16-5-1-13(2-6-16)18-19(14-9-11-22-12-10-14)24-20(23-18)15-3-7-17(25)8-4-15;/h1-12,25H,(H,23,24);1H

4-[4-(4-fluorophenyl)-5-pyridin-4-yl-1H-imidazol-2-yl]phenol;hydrochloride

350228-36-3; SB 202190 Hydrochloride; SB 202190 (hydrochloride); 4-(4-(4-FLUOROPHENYL)-5-(PYRIDIN-4-YL)-1H-IMIDAZOL-2-YL)PHENOL HYDROCHLORIDE; SB202190 hydrochloride; FHPI HCL; SB202190 HCl; 4-[4-(4-fluorophenyl)-5-pyridin-4-yl-1,3-dihydroimidazol-2-ylidene]cyclohexa-2,5-dien-1-one;hydrochloride;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : 83.33 mg/mL (226.56 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。