规格 | 价格 | |
---|---|---|
500mg | ||
1g | ||
Other Sizes |
靶点 |
Dye reagent;DNA Stain
|
---|---|
体外研究 (In Vitro) |
1.Hoechst工作液的制备
1.1:Hoechst母液/储备液的制备。使用DMSO/二甲基亚砜制备1 mg/mL Hoechst储备液。 *注:分装后,Hoechst/储备液应在-4°C或-20°C避光储存。 1.2:制备工作液:用PBS或无血清细胞培养基将储备溶液稀释至10μg/mL的Hoechst工作液。 *注意:使用前,请确保Hoechst工作溶液的浓度适合您的实验,现配现用。 2.细胞染色(悬浮细胞) 2.1:离心细胞,加入PBS,然后洗涤两次,每次5分钟,或直到细胞密度达到1×106/mL。 2.2:加入1 mL Hoechst工作溶液,室温孵育/静置3–10分钟。 2.3:以400 g离心3-4分钟,然后弃上清液。 2.4:用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。 2.5:将细胞重新悬浮在1mL PBS或无血清培养基中,并使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。 3.细胞染色(贴壁细胞) 3.1:将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 3.2:从培养基上取下盖玻片,取出多余的培养基。 3.3:加入100μL染料工作液,轻轻摇晃至完全覆盖细胞,孵育3-10分钟。 3.4:取出染料工作液,用培养基洗涤2-3次,每次5分钟,用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 注意事项 1. 请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度,现配现用。 2. 本产品仅限于专业科研人员的科研用,不能用于临床诊断、治疗、食品或药品。 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
酶活实验 |
Hoechst 33342与小凹槽中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的DNA区域结合。与DNA结合后,荧光大大增加。该方案描述了使用Hoechst 33342标记培养物中生长的细胞的核DNA。Hoechst 33342也可用于通过用Hoechst 333 42代替DAPI对固定细胞进行染色。[1]
Hoechst 33342也可用于通过在使用DAPI标记核DNA(Chazotte 2011a)中描述的方案中用Hoechst 333 42代替DAPI来染色固定细胞。内源性细胞分子(如还原形式的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸或黄素腺嘌呤二核苷酸)的自身荧光可通过降低信噪比干扰成像。当探针和自荧光分子的激发和/或发射波长相似时,例如,经常具有<500nm的激发波长,特别是在紫外波长时,就会发生这种情况。通过仔细选择所用的激发和发射波长,用还原剂(例如1%硼氢化钠[NaBH4]溶液处理固定细胞20分钟),以及将实验图像与未标记的对照载玻片进行比较,可以减少自身荧光。避免用戊二醛固定,因为它会增加细胞自发荧光的干扰,最常见的是波长<500 nm。[1] 该方案假设感兴趣的细胞在玻璃显微镜盖玻片上生长,盖玻片浸入含有培养基的小培养皿中。通常,标记条件因细胞类型而异,可能有必要针对特定用途更改方案。要安装使用此处描述的技术标记的细胞,请参见将活细胞安装到显微镜载玻片上(Chazotte 2011b)。[3] <小时> 有许多荧光染色可用于标记DNA,并允许容易地观察间期细胞中的细胞核和有丝分裂细胞中的染色体。Hoechst 33342的一个优点是它是膜渗透性的,因此可以对活细胞进行染色。Hoechst 33342与小凹槽中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶的DNA区域结合。与DNA结合后,荧光大大增加。该方案描述了使用Hoechst 33342标记培养物中生长的细胞的核DNA。 |
细胞实验 |
方法[1]
在Protocol执行期间,任何时候都不要让细胞变干 1.将Hoechst储备溶液在H2O中以1:100稀释,用于标记 2.从盖玻片上生长的细胞中吸出细胞培养基。用PBS+冲洗细胞三次 3.在室温下将细胞在Hoechst标记溶液(来自步骤1)中孵育10-30分钟 4.抽吸标签溶液。在PBS+中冲洗细胞三次 5.如在显微镜载玻片上安装活细胞(Chazotte 2011b)[3]中所述安装盖玻片[3] 6.对细胞成像(对于Hoechst 33342,其λex~353 nm,λem~483 nm) |
参考文献 |
[1]. Chazotte B. Labeling nuclear DNA with hoechst 33342. Cold Spring Harb Protoc. 2011 Jan 1;2011(1):pdb.prot5557.
[2]. Chazotte B (2011a) Labeling nuclear DNA using DAPI. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5556. [3]. Chazotte B (2011b) Mounting live cells onto microscope slides. Cold Spring Harb Protoc doi:10.1101/pdb.prot5554. |
其他信息 |
Cell Staining Example 1:
Hoechst 33342 may be utilized for staining nuclei with blue fluorescence. Cell Staining Example 2: Hoechst 33342 may be utilized for staining nuclei with blue fluorescence to detect apoptosis. 1. Stain cells with Hoechst 33342 (10 min). 2. Observe with a fluorescence microscope (imaging). Cell Staining Example 3: Hoechst 33342 may be utilized for labelling chromatin with blue fluorescence. 1. Chromatin is counterstained briefly with Hoechst 33342 (5 µg/mL) before imaging. 2. Observe with a confocal microscope (imaging). |
分子式 |
C32H37N7CL2.3[HCL]
|
---|---|
分子量 |
699.97
|
精确质量 |
697.179
|
CAS号 |
159277-19-7
|
PubChem CID |
197365
|
外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
沸点 |
841.2ºC at 760mmHg
|
蒸汽压 |
1.59E-28mmHg at 25°C
|
LogP |
8.726
|
tPSA |
67.08
|
氢键供体(HBD)数目 |
5
|
氢键受体(HBA)数目 |
5
|
可旋转键数目(RBC) |
11
|
重原子数目 |
44
|
分子复杂度/Complexity |
784
|
定义原子立体中心数目 |
0
|
SMILES |
Cl.Cl.Cl.ClCCN(C1C=CC(CCCC2=NC3C=CC(C4=NC5C=CC(N6CCN(C)CC6)=CC=5N4)=CC=3N2)=CC=1)CCCl
|
InChi Key |
PLUDBJRFRHMTGA-UHFFFAOYSA-N
|
InChi Code |
InChI=1S/C32H37Cl2N7.3ClH/c1-39-17-19-41(20-18-39)26-10-12-28-30(22-26)38-32(37-28)24-7-11-27-29(21-24)36-31(35-27)4-2-3-23-5-8-25(9-6-23)40(15-13-33)16-14-34;;;/h5-12,21-22H,2-4,13-20H2,1H3,(H,35,36)(H,37,38);3*1H
|
化学名 |
N,N-bis(2-chloroethyl)-4-[3-[6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazol-2-yl]propyl]aniline;trihydrochloride
|
别名 |
Hoechst 33342 analog trihydrochloride
|
HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
---|---|
溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 1.4286 mL | 7.1432 mL | 14.2863 mL | |
5 mM | 0.2857 mL | 1.4286 mL | 2.8573 mL | |
10 mM | 0.1429 mL | 0.7143 mL | 1.4286 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。